Гэр > Блог > Аж үйлдвэрийн мэдээ

ELISA иж бүрдэл ямар үүрэгтэй вэ?

2022-12-23

ELISA иж бүрдэл нь эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиеийн хатуу фаз, эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиеийн ферментийн шошго дээр суурилдаг. Хатуу зөөвөрлөгчийн гадаргуутай холбогдсон эсрэгтөрөгч буюу эсрэгбие нь дархлаа судлалын идэвхээ хадгалсан хэвээр байгаа бөгөөд эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбие гэж тэмдэглэгдсэн фермент нь дархлааны болон ферментийн идэвхийг хоёуланг нь хадгалдаг. Тодорхойлох үед туршилтанд хамрагдсан сорьц (эсрэгбие эсвэл эсрэгтөрөгчийг хэмждэг) хатуу зөөвөрлөгчийн гадаргуу дээрх эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиетэй урвалд ордог. Хатуу зөөгч дээр үүссэн эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг угаах замаар шингэн дэх бусад бодисоос тусгаарладаг.

Ферментийн шошготой эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиемүүдийг нэмдэг бөгөөд тэдгээр нь мөн хатуу зөөгчтэй урвалаар холбогддог. Энэ үед хатуу фаз дахь ферментийн хэмжээ нь сорьц дахь бодисын хэмжээтэй пропорциональ байна. Ферментийн урвалын субстратыг нэмсний дараа субстрат нь ферментээр катализ болж өнгөт бүтээгдэхүүн болдог. Бүтээгдэхүүний хэмжээ нь сорьцонд орсон бодистой шууд хамааралтай байдаг тул өнгөний гүнээс хамаарч чанарын болон тоон шинжилгээг хийж болно.

Ферментийн катализаторын өндөр үр ашиг нь дархлааны хариу урвалын үр дүнг шууд бусаар нэмэгдүүлж, шинжилгээг маш мэдрэмтгий болгодог. ELISA нь эсрэгтөрөгчийг тодорхойлоход ашиглаж болохоос гадна эсрэгбиемийг тодорхойлоход ашиглаж болно.

ELISA багцын үндсэн зарчим
Энэ нь объектыг ферменттэй холбохын тулд эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн өвөрмөц урвалыг ашигладаг бөгөөд дараа нь тоон үзүүлэлтийг тодорхойлохын тулд фермент ба субстратын хооронд өнгөт урвал үүсгэдэг. Хэмжилтийн объект нь эсрэгбие эсвэл эсрэгтөрөгч байж болно.

Энэ тодорхойлох аргад гурван урвалж шаардлагатай:
â  Хатуу фазын эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбие (дархлаа шингээгч)
â¡ Ферментийн шошготой эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбие (маркер)
⢠ферментийн үйл ажиллагааны субстрат (өнгө хөгжүүлэх бодис)

Хэмжилт хийхэд эсрэгтөрөгч (эсрэгбие) нь эхлээд хатуу зөөгчтэй холбогддог боловч дархлааны идэвхээ хадгалсаар, дараа нь эсрэгбие (эсрэгтөрөгч) ба ферментийн коньюгат (маркер) нэмж, анхны дархлааны идэвх, ферментийг хадгалсаар байна. үйл ажиллагаа. Коньюгат нь хатуу зөөгч дээрх эсрэгтөрөгчтэй (эсрэгбие) урвалд ороход ферментийн харгалзах субстрат нэмэгддэг. Энэ нь каталитик гидролиз эсвэл REDOX урвал ба өнгө юм.

Түүний гаргаж буй өнгөний сүүдэр нь хэмжих ёстой эсрэгтөрөгчийн (эсрэгбие) хэмжээтэй пропорциональ байна. Энэхүү өнгөт бүтээгдэхүүнийг нүцгэн нүд, оптик микроскоп, электрон микроскопоор ажиглаж, спектрофотометрээр (фермент шошгоны хэрэгсэл) хэмжиж болно. Энэ арга нь энгийн, тохиромжтой, хурдан бөгөөд тодорхой юм.

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept